HLA-A, -B, -DR en receptores de trasplante de médula ósea en Uruguay: Sistema nacional de registro, tipificación y búsqueda de donantes de médula ósea y progenitores hematopoyéticos (SINDOME)

Milka Bengochea; Inés Álvarez; Pedro C. Hidalgo; Adriana Cabrera; Olga Senatore; Roberto Toledo; Elena Carreto; Martha Sosa; Doris Abilleira; Ely Silva

Autores/as

Milka Bengochea Universidad de la República, Facultad de Medicina, Hospital de Clínicas, Banco Nacional de Órganos y Tejidos, Prof. Adjunta
Inés Álvarez Universidad de la República, Facultad de Medicina, Hospital de Clínicas, Banco Nacional de Órganos y Tejidos, Profesora
Pedro C. Hidalgo Universidad de la República, Facultad de Medicina, Hospital de Clínicas, Banco Nacional de Órganos y Tejidos, Genetista
Adriana Cabrera Universidad de la República, Facultad de Medicina, Hospital de Clínicas, Banco Nacional de Órganos y Tejidos, Laboratorio de Inmunogenética e Histocompatibilidad, Laboratorio Clínico, Licenciada
Olga Senatore Universidad de la República, Facultad de Medicina, Hospital de Clínicas, Banco Nacional de Órganos y Tejidos, Programa SINDOME, Asistente Social
Roberto Toledo Universidad de la República, Facultad de Medicina, Hospital de Clínicas, Banco Nacional de Órganos y Tejidos, Prof. Agregado
Elena Carreto Universidad de la República, Facultad de Medicina, Hospital de Clínicas, Banco Nacional de Órganos y Tejidos, Ex asistente
Martha Sosa Universidad de la República, Facultad de Medicina, Hospital de Clínicas, Banco Nacional de Órganos y Tejidos, Laboratorio de Inmunogenética e Histocompatibilidad, Técnico en Hemoterapia
Doris Abilleira Universidad de la República, Facultad de Medicina, Hospital de Clínicas, Banco Nacional de Órganos y Tejidos, Laboratorio de Inmunogenética e Histocompatibilidad, Laboratorio Clínico, Licenciada
Ely Silva Universidad de la República, Facultad de Medicina, Hospital de Clínicas, Banco Nacional de Órganos y Tejidos, Laboratorio de Inmunogenética e Histocompatibilidad, Laboratorio Clínico, Licenciada

Palabras clave:

ANTÍGENOS HLA-A, ANTÍGENOS HLA-B, ANTÍGENOS HLA-DR, HISTOCOMPATIBILIDAD, TRANSPLANTACIÓN DE MÉDULA ÓSEA, TRANSPLANTACIÓN DE CÉLULAS MADRES HEMATOPOYÉTICAS, URUGUAY

Resumen

Introducción: Uruguay posee un sistema solidario de financiación de trasplante a través del Fondo Nacional de Recursos y del Banco Nacional de Órganos y Tejidos (BNOT).
En el trasplante alogénico de médula ósea la compatibilidad HLA es una barrera biológica importante. Las frecuencias alélicas y haplotípicas HLA son utilizadas para determinar la probabilidad de encontrar un donante con un fenotipo particular HLA y para predecir el efecto de diversos esquemas de adjudicación basados en la compatibilidad en este sistema. El Laboratorio de Inmunogenética e Histocompatibilidad tipifica a todos los receptores y donantes del país. En este marco se ha iniciado un programa cuyo objetivo central es organizar un sistema de registro, tipificación y búsqueda de donantes no relacionados a nivel nacional (SINDOME).
Los objetivos del presente trabajo han sido analizar los receptores tipificados para trasplante de médula ósea (TMO) alogénico en nuestro servicio en el período enero 1997 - mayo 2002, y caracterizar la constitución genética del sistema HLA para 298 receptores.
Material y método: en el lapso indicado se estudiaron 346 receptores y 1.083 donantes. Se realizó la tipificación HLA clase I por reacción de microlinfocitotoxicidad con anticuerpos monoclonales y la tipificación de clase II por reacción en cadena de la polimerasa con hibridización (PCR-SSO) reversa, con nivel de resolución intermedio-alta. Se estimaron las frecuencias alélicas y haplotípicas en una muestra de 298 receptores.
Resultados: de los 346 receptores de TMO estudiados en el marco del SINDOME, 58% es menor de 30 años. La relación donante/receptor fue de 3,13 pero sólo 45% de los candidatos a trasplante tuvo un donante histocompatible.
En el análisis del polimorfismo de HLA-A,-B,-DR en la muestra de 298 receptores se encontró que los alelos más prevalentes fueron A2 (28,97%), B35 (12,49%) y DR04 (15,24%). Sólo para el locus HLA-DRB1 la desviación del equilibrio de Hardy-Weinberg fue altamente significativa. Los haplotipos más comunes fueron A2-B51 y A2-B7 para HLA-A,-B, A2-DR11 y A2-DR04 para HLA-A -DRB1, y el haplotipo B8-DR03 para HLA-B -DR. De los haplotipos HLA-A -B -DRB1, HLA-A1 -B8 -DR03 y HLA-A2 -B51 -DR13 fueron los más frecuentes.
Conclusión: nuestros resultados demuestran que el sistema HLA presenta una considerable heterogeneidad, con un enorme polimorfismo y una amplia distribución de haplotipos. La posibilidad de encontrar donantes compatibles para un subgrupo de jóvenes con enfermedades malignas sin donantes familiares es muy baja en el contexto de nuestra población. En estos casos la búsqueda en los registros internacionales de donantes puede ser la única alternativa a fin de encontrar un donante histocompatible para un trasplante alogénico.

Citas

1) Thomas E, Storb R, Clift RA, Fefer A, Johnson FL, Neiman PE, et al. Bone-marrow transplantation. N Engl J Med 1975; 292: 832-43.
2) Remberger M, Ringdén O, Blau I, Ottinger H, Kremens B, Kiehl M, et al. No difference in graft-versus-host disease, relapse, and survival comparing peripheral stem cells to bone marrow using unrelated donors. Blood 2001; 98: 1739-45.
3) Kurtzberg J, Laughlin M, Graham L, Smith C, Olson J, Halperin E, et al. Placental Blood as a source of hematopoietic stem cells for transplantation into unrelated recipients. N Eng J Med 1996; 335: 157-66.
4) Rocha V, Cornish J, Sievers E, Filipovich A, Locatelli F, Peters C, et al. Comparison of outcomes of unrelated bone marrow and umbilical cord blood transplants in children with acute leukemia. Blood 2001; 97: 2962-71.
5) Molina A, Popplewell L, Kashyap A, Nademanee A. Hematopoietic Stem cell transplantation in the new Millenium: Report from City of Hope National Medical Center. In: Cecka JN, Terasaki PI, eds. Clinical Transplants 1999. Los Angeles: UCLA Immunogenetics Center, 1999: 317-42.
6) International Bone Marrow Transplant Registry (IBMTR) and the Autologous Blood and Marrow Transplant Registry. 2001 IBMTR/ABMTR statistical center report of survival statistics for blood and marrow transplants. http://www.ibmtr.org/infoserv/info_rep.html (visto el 17/9/2003).
7) Fondo Nacional de Recursos. Medicina Altamente Especializada. Informe: Programa de Seguimiento Trasplante de Médula Ósea. Montevideo: FNR, 2002.
8) National Marrow Donor Program. 1999 Data & Scientific Report of the National Donor Program. U.S. Department of Health and Human Services. Health Resources and Services Administration Office of Special Programs. Division of Transplantation. Miniapolis: NMDP, 2000.
9) Bishop M, Flowers ME, Foss F, Couriel D. Emerging Strategies in the tr eatment of Chronic Graft-versus-Host Disease. Blood Marrow Transplant Rev 2002; 12: 4-15.
10) Vela Ojeda J. Trasplante alogénico de células hematopoyéticas no mieloablativo. Gac Méd Méx 2002; 138: 142-4.
11) Van Deerlin VMD, Leonard DGB. Bone marrow engraftment analysis after allogeneic bone marrow transplantations. Clin Lab Med 2000; 20: 197-225.
12) Wood K, Sachs DH. Chimerism and transplantation tolerance: cause and effect. Immunol Today 1996; 17: 584-9.
13) Zinkernagel RM, Doherty PC. Restriccion of in vitro T-cell-mediated cytotoxicity in lymphocytic choriomeningitis within a syngeneic or semiallogeneic system. Nature 1974; 248: 701-2.
14) Newton-Nash D. The molecular basis of allorecognition. Hum Immunol 1994; 41: 105-11.
15) The MHC sequence consortium. Complete sequence and gene map of a human major histocompatibility complex. Nature 1999; 40: 921-3.
16) Jordan F, McWhinnie A, Turner S, Gavira N, Calvert A, Cleaver S, et al. Comparison of HLA DRB1 typing by DNA-RFLP, PCR-SSO and PCR-SSP methods and their application in providing matched unrelated donors for bone marrow transplantation. Tissue Antigens 1995; 45: 103-10.
17) Little A, Marsh S, Madrigal A. Current methodologies of human leukocyte antigen typing utilized for bone marrow donor selection. Curr Opin Hematol 1998; 5: 419-28.
18) Marsh SG. The HLA Sequence Database. HLA Informatics group. http://www.anthonynolan.com (visto el 14/10/2002).
19) Mori M, Beatty P, Graves M, Boucher K, Mildford E. HLA gene and haplotype frequencies in the North American population. Transplantation 1987; 64: 1017-27.
20) Shipper RF, D'Amaro J, Bakker JT, Bakker J, Van Rood JJ, Oudshoorn M. HLA gene and haplotype frequencies in bone marrow donors worldwide registries. Hum Immunol 1997; 52: 54-71.
21) Zachary AA, Steinberg AG, Bias WB, Leffell MS. The frequencies of HLA alleles and haplotypes and their distribution among donors and renal patients in the UNOS registry. Transplantation 1996; 62: 272-83.
22) Bengochea M, Álvarez I, Toledo R, Cabrera A, Abilleira D, Silva E, et al. Frecuencias HLA A y B estudiadas con anticuerpos monoclonales. Libro de Resúmenes. Congreso Latinoamericano de Antropología Biológica, 4, Piriápolis: ALAB, 2000: 48.
23) Petersdorf E, Longton G, Anasetti C, Mickelson E, McKinney S, Smith A. Association of HLA-C disparity with graft failure after marrow transplantation from unrelated Donors. Blood 1997; 89: 1818-23.
24) Petersdorf E, Longton G, Anasetti C, Mickelson E, Smith A, Martin P, et al. Definition of HLA-DQ as a transplantation antigen. Proc Natl Acad Sci USA 1996; 93: 15358-63.
25) Madrigal A, Scott I, Arguello R, Szydlo R, Little A, Goldman J, et al. Factors influencing the outcome of bone marrow transplants using unrelated donors. Immunol Rev 1997; 157: 153-66.
26) Petersdorf E, Mickelson E, Anasetti C, Martin P, Woolfrey A, Hansen J. Effect of HLA mismatches on the outcome of hematopoietic transplants. Curr Opin Immunol 1999; 11: 521-6.
27) Scott I, O'Shea J, Bunce M, Tiercy J, Arguello J, Firman H, et al. Molecular typing shows a high level of HLA class I incompatibility in serologically well matched donor/patient pairs: Implications for unrelated bone marrow donor selection. Blood 1998; 92: 4864-71.
28) Petersdorf E, Gooley T, Anasetti C, Martin P, Smith A, Mickelson E, et al. Optimizing outcome after unrelated marrow transplantation by comprehensive matching of HLA class I and II alleles in the donor and Recipient. Blood 1998; 92: 3515-20.
29) Henslee-Downe PJ, Abhyankar S, Parrish R, Pati A, Godder K, Neglia W, et al. Use of partially mismatched related donors extends access to allogeneic marrow transplant. Blood 1997; 89: 3864-72.
30) Barker JN, Krepski T, DeFor T, Davies S, Wagner J, Weisdorf D, et al. Searching for unrelated donor haemopoietic stem cell: Avaibility and speed of umbilical cord blood versus Bone marrow. Biol Blood Marrow Transplant 2002; 8: 257-60.
31) Bone Marrow Donor Worldwide. Annual Reports 2001. Leiden: Drukkerij Groen. http://www.bmdw.org (visto el 28/8/2002).
32) O'Shea J, Cleaver S, Little A, Madrigal A. Searching for an unrelated haemopoietic stem cell donor- A United Kingdom Perspective. In: Cecka JN, Terasaki PI, ed. Clinical Transplants 1999. Los Angeles: UCLA Immunogenetics Center, 1999: 129-37.
33) Terasaki PI, Pernoco F, Park MS, Ozturk G, Iwaki Y. Microdroplet testing for HLA A,B,C and D antigens. Am J Clin Pathol 1978; 69: 103-20.
34) Gustincich S, Manfiolett G, Del Sal G, Schneider C, Carminci P. A fast method for high-quality genomic DNA extraction from whole human blood. BioTechniques 1991; 11: 298.
35) Bugawan T, Erlich H. A method for typing polymorphism at HLA A locus using PCR amplification and immobilized oligonucleotide probes.Tissue Antigens 1994; 44: 137-47.
36) Marsh SGE. Nomenclature for factors of the HLA system. http:// www.anthonynolan.com/HIG/nomenc.html (visto el 30/12/2002).
37) Gjertson DW, Geer L, Lee S-H, Kawata J, Sutrino R. Populations studies. In: Terasaki PI, Gjertson DW, ed. HLA 1997. Los Angeles: UCLA Tissue Typing Laboratory. 1997: 171-3.
38) Weir BS. Genetic Data Analysis II. 2da. ed. Sunderland: Sinauer, 1996: 105-33.
39) Schneider S, Roessli D, Excoffier L. Arlequin ver. 2.000. A software for population genetic data analysis. Genetics and Biometry Laboratory. Geneva: University of Geneva, 2000.
40) Lewontin RC. On measures of gametic disequilibrium. Genetics 1988; 120: 849-52.
41) Thomson G, Baur MP. Third order linkage disiquilibrium. Tissue Antigens 1984; 24: 250-5.
42) Guo SW, Thompson EA. Performing the exact test of Hardy-Weinberg proportion for multiple alleles. Biometrics 1992; 48: 361-72.
43) Álvarez I, Sans M, Toledo R, Sosa M, Bengochea M, Salzano FM. Hla gene and haplotype frequencies in Uruguay. Int J Anthrop 1993; 8: 163-8.
44) Lonjou C, Clayton J, Cambon-Thomsen A, Raffoux C. HLA -A, -B, -DR haplotype frequencies in France-Implications for recruitment of potential bone marrow donors. Transplantation 1995; 60: 375-83.
45) Cao K, Hollenbach J, Shi X Shi W, Chopek M, Fernández-Viña MA. Analysis of the frequencies of HLA-A, B, and C alleles and haplotypes in the five major ethnic groups of the United States reveals high levels of diversity in these loci and constrasting distribution pattern in these populations. Hum Immunol 2001; 62: 1009-30.