Desarrollo y ensayo de dos procedimientos para la detección rápida de Streptococcus agalactiae en exudados vaginorrectales
Palabras clave:
STREPTOCOCCUS AGALACTIAE, COMPLICACIONES INFECCIOSAS DEL EMBARAZOResumen
Introducción: la infección por Estreptococo grupo B (EGB) puede afectar gravemente a la madre y al feto durante la gestación y al recién nacido luego del parto. Actualmente, el diagnóstico de colonización durante el embarazo se realiza por métodos microbiológicos a partir de exudados vaginorrectales.
Objetivo: desarrollar métodos rápidos y de bajo costo para la detección del antígeno grupo específico de EGB en exudados vaginorrectales.
Material y método: se utilizaron dos cepas de EGB, una autóctona (IH23) y la cepa de referencia O90R, que solo expresa el polisacárido específico de grupo. Para cada una se preparó un antisuero policlonal que se utilizó para el desarrollo de un test inmunocromatográfico y uno de aglutinación de látex. Como controles se emplearon cultivos bacterianos, polisacáridos purificados de EGB y muestras vaginorrectales.
Resultados: los límites de detección obtenidos para la inmunocromatografía fueron de 210 µg/ml y 50 µg/ml para los polisacáridos purificados de sobrenadante y pared, respectivamente, no lográndose detectar antígenos de EGB en las muestras clínicas analizadas. El límite de detección del látex fue 65 µg/ml frente al polisacárido purificado de sobrenadante de cultivo de IH23 y 6,5 x 107 UFC/ml de IH23. La sensibilidad y especificidad para el látex fue de 30% y 90%, respectivamente.
Conclusiones: los métodos desarrollados no alcanzaron el límite de detección requerido para su aplicación en muestras clínicas. Esto concuerda con lo descripto en la bibliografía para ensayos rápidos basados en reacciones antígeno-anticuerpo y muestra la necesidad de agregar pasos previos de extracción y concentración o mejorar la calidad de los reactivos inmunológicos empleados.
Citas
(2) Edwards M. Group B Streptococcal Infections. In: Remington J, Klein J, Wilson Ch, Baker C, eds. Infectious diseases of the fetus and newborn infant. 6th ed. Philadelphia: Elsevier, Saunders, 2006: 404-64.
(3) Centers for Disease Control and Prevention. Group B Streptococcal Prevention. Atlanta: CDC, 2006.
(4) Verani JR, McGee L, Schrag SJ; Division of Bacterial Diseases, National Centerfor Immunization and Respiratory Diseases, Centers for Disease Control and Prevention. Prevention of perinatal group B streptococcal disease: revised guidelines from CDC, 2010. MMWR Recomm Rep 2010; 59(RR-10): 1-36.
(5) Jaime WE, Edwards RK, Duff P. Vaginal-perianal compared with vaginal-rectal cultures for identification of group B streptococci. Obstet Gynecol 2004; 104(5 Pt 1): 1058-61.
(6) Jauréguy F, Carton M, Teboul J, Butel MJ, Panel P, Ghnassia JC, et al. Risk factors and screening strategy for group B streptococcal colonization in pregnant women: results of a prospective study. J Gynecol Obstet Biol Reprod (Paris) 2003; 32(2): 132-8.
(7) Stoll BJ, Schuchat A. Maternal carriage of group B streptococci in developing countries. Pediatr Infect Dis J 1998; 17(6): 499-503.
(8) Orrett F. Colonization of Group B Streptococci in pregnancy and outcome of infected neonates in Trinidad. Pediatr Int 2003; 45(3): 319-23.
(9) de Lourdes Collado M, Kretschmer RR, Becker I, Guzmán A, Gallardo L, Lepe CM. Colonization of Mexican pregnant women with group B Streptococcus (Letter). J Infect Dis 1981; 143(1): 134.
(10) Barillaro S, Monzo C, Negrin G, Brazeiro D. Prevalencia del estreptococo beta agalactiae en la población de embarazadas que consultan en la D.N.S.FF.AA. Salud Militar 2003; 25(1). Disponible en: http://www.dnsffaa.gub.uy/revista/vol25/P48a57V25.htm. Consulta: 7 junio 2010.
(11) Rivas C, Tallac I, Etchenique A. Colonización vaginorrectal por Streptococcus del grupo B en mujeres embarazadas, entre las 35 a 37 semanas de gestación. Rev Méd Urug 2006; 22(3): 191-6.
(12) Bello Pedrosa O, Perotti Pais E. Enfermedad invasiva por estreptococo del grupo B. Arch Pediatr Urug 2004; 75(2): 150-4
(13) Laufer J, Scasso S, Sosa C, Rodríguez-Cuns G, Alonso J, Pons J. Group B streptococcus colonization among pregnant women in Uruguay. Int J Gynaecol Obstet 2009; 104(3): 242-3.
(14) Ministerio de Salud Pública. Dirección General de la Salud. Programa Nacional Prioritario de Salud de la Mujer y Género. Guías en salud sexual y reproductiva: normas de atención a la mujer embarazada. Disponible en: http://www.msp.gub.uy/uc_1667_1.html. Consulta: 7 junio 2010.
(15) Schrag S, Gorwitz R, Fultz-Butts K, Schuchat A. Prevention of perinatal group B streptococcal disease: revised guidelines from CDC. MWWR Recomm Rep 2002; 51(RR-11): 1-22.
(16) Smaill F. Intrapartum antibiotics for group B streptococcal colonisation. Cochrane Database Syst Rev 2000; (2): CD000115.
(17) Money DM, Dobson S; Canadian Paediatric Society. Infectious Diseases Commitee. The prevention of early-onset neonatal group B streptococcal disease. J Obstet Gynaecol Can 2004; 26(9): 826-32.
(18) Amstey MS, Gibbs RS. Is penicillin G a better choice than ampicillin for prophylaxis of neonatal group B streptococcal infections? Obstet Gynecol 1994; 84(6): 1058-9.
(19) Royal College of Obstetricians and Gynaecologists. Group B Streptococcal Disease, Early Onset (Green-top 36): prevention of early onset neonatal group B streptococcal disease. London: RCOG, 2003.
(20) Picard F, Bergeron M. Laboratory detection of group B Streptococcus for prevention of perinatal disease. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 2004; 23(9): 665-71.
(21) Edwards RK, Novak-Weekley SM, Koty PP, Davis T, Leeds LJ, Jordan JA. Rapid group B streptococci screening using a real-time polymerase chain reaction assay. Obstet Gynecol 2008; 111(6): 1335-41.
(22) Hujakka H, Koistinen V, Eerikäinen P, Kuronen I, Mojonen I, Parviainen M, et al. New immunochromatographic rapid test for diagnosis of acute Puumala Virus Infection. J Clin Microbiol 2001; 39(6): 2146-50.
(23) Wever PC, Yzerman EP, Kuijper EJ, Speelman P, Dankert J. Rapid diagnosis of legionaries disease using an immunochromatographic assay for Legionella pneumophila serogroup 1 antigen in urine during an outbreak in the Netherlands. J Clin Microbiol 2000; 38(7): 2738-9.
(24) Curtis SN, Krause RM. Antigenic Relationships between groups B and G streptococci. J Exp Med 1964; 120: 629-37.
(25) Baker CJ, Kasper DL, Davis CE. Immunochemical characterization of the nativetype III polysaccharide of group B streptococcus. J Exp Med 1976; 143(2): 258-70.
(26) Wessels MR, Benedí WJ, Jennings HJ, Michon F, DiFabio JL, Kasper DL. Isolation and characterization of type IV group B Streptococcus capsular polysaccharide. Infect Immun 1989; 57(4): 1089-94.
(27) Horisberger M. Evaluation of colloidal gold as a cytochemical marker for transmission and scanning electron microscope. Biol Cell 1979; 36: 253-8.
(28) Hermanson GT. Bioconjugate Techniques. San Diego, California: Academic Press, 1996: 593-604.
(29) Yancey MK, Armer T, Clark P, Duff P. Assessment of rapid identification tests for genital carriage of group B streptococci. Obstet Gynecol 1992; 80(6): 1038-47.
(30) Daniels J, Gray J, Pattison H, Roberts T, Edwards E, Milner P, et al. Rapid testing for group B streptococcus during labour: a test accuracy study with evaluation of acceptability and cost-effectiveness. Health Technol Assess 2009; 13(42): 1-154.
(31) Helvetica Health Care. Bionexia Streptokokken B antigen. Disponible en:http://www.helveticahealthcare.com/BioNexia%20-%20brochures/Bionexia-flyer-StrepB%20-%20ENG-FR-GER.pdf. Consulta: 8 junio 2010.